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同一批次提取蛋白跑出的条带不一致的情况

问:每次提蛋白后会将样品在短时间内重复2-3次WB,但是每次跑出的条带趋势不一致,上样量和其他条件都没有变,内参基本是整齐稳定的,为什么目的条带就是不一致?

答:内参稳定说明上样量稳定(应该大致是一样的),所以不存在什么上样量不一样的问题;出现这样的结果,问题出在每一步都有一定的可能性,比如电泳,转膜,敷抗体,显色等等。但据我所知,WB最关键的还是转膜和敷抗体步骤,可能是敷抗体的时候敷的不均匀。建议是再认认真真,仔仔细细做几遍,很可能重复性就做出来了。

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